實(shí)驗(yàn)介紹
CRISPR/Cas9是細(xì)菌和古細(xì)菌不斷進(jìn)化而獲得的免疫防御機(jī)制, II型CRISPR/Cas9免疫系統(tǒng)依賴Cas9內(nèi)切酶家族靶向和剪切外源DNA,基本原理為該系統(tǒng)首先通過小導(dǎo)向RNA(sgRNA) 對切割區(qū)域進(jìn)行識別,進(jìn)而利用Cas9內(nèi)切酶實(shí)現(xiàn)靶向區(qū)域的切割以產(chǎn)生DNA雙鏈斷裂。利用該技術(shù),可實(shí)現(xiàn)細(xì)胞系中特定基因的定點(diǎn)敲除和修飾,便于在細(xì)胞水平進(jìn)行基因功能分析,如對打靶細(xì)胞進(jìn)行藥物篩選,或者構(gòu)建點(diǎn)突變穩(wěn)定細(xì)胞株用于藥物靶點(diǎn)研究。

服務(wù)流程

客戶提供
● 生長期活躍的哺乳動物原代細(xì)胞或細(xì)胞系(無支原體污染)
● 目的基因或蛋白名稱/序列號

服務(wù)優(yōu)勢
● 系統(tǒng)化的實(shí)驗(yàn)方法,實(shí)現(xiàn)從gRNA設(shè)計(jì)、篩選、載體構(gòu)建到穩(wěn)定細(xì)胞株篩選的一站式服務(wù)
● 權(quán)威化的檢測手段
● 標(biāo)準(zhǔn)化的服務(wù)流程,2個(gè)月內(nèi)交付陽性細(xì)胞
● 真實(shí)清晰完整的報(bào)告呈現(xiàn)
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北京健坤禾潤科技有限公司(以下簡稱“健坤禾潤”)成立于2011年4月,是一家提供專業(yè)醫(yī)學(xué)科研服務(wù)咨詢及技術(shù)服務(wù)的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)平臺。
健坤禾潤建有標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)室,獨(dú)立擁有一系列先進(jìn)的硬件設(shè)施,包括confocal、流式儀、發(fā)光檢測儀、MD酶標(biāo)儀、實(shí)時(shí)定量PCR儀、獨(dú)立細(xì)胞室、熒光顯微鏡等,并開展各種細(xì)胞原代分離、細(xì)胞處理、分子生物學(xué)、免疫生物學(xué)等研究,在細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等領(lǐng)域已形成了專業(yè)優(yōu)勢。
健坤禾潤擁有博士后、博士等一批專注于機(jī)制研究的科研人員。除單項(xiàng)技術(shù)服務(wù)之外,健坤禾潤還可以為廣大臨床客戶和科研工作者提供轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)整體項(xiàng)目的方案設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)實(shí)施、數(shù)據(jù)分析、報(bào)告總結(jié)等一站式科研咨詢和技術(shù)服務(wù),目前我們已經(jīng)與全國知名三甲醫(yī)院、高校和科研院所建立了長期技術(shù)合作關(guān)系。
健坤禾潤密切關(guān)注和跟蹤國內(nèi)外各個(gè)醫(yī)學(xué)學(xué)科的研究動態(tài)與進(jìn)展,用科研機(jī)制的方式驗(yàn)證、闡述疾病機(jī)理,提升科研的創(chuàng)新性和連續(xù)性。
服務(wù)內(nèi)容涉及
分子生物學(xué)
qPCR;定點(diǎn)突變;多重PCR;數(shù)字PCR;SNP分型;核酸提取與純化;基因克隆與表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建
細(xì)胞生物學(xué)
細(xì)胞活力/增殖/凋亡/周期;細(xì)胞分離培養(yǎng);熒光素酶報(bào)告基因試驗(yàn);CRISPR/Cas9(細(xì)胞);細(xì)胞轉(zhuǎn)染/穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建;細(xì)胞共培養(yǎng);細(xì)胞及亞細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)觀測;EMT相關(guān)檢測
免疫生物學(xué)
免疫組織化學(xué)(IHC); ChIP/ChIP-seq/EMSA;Western-Blotting;免疫熒光(IF);原位雜交(In Situ Hybridization);IP/CoIP/CoIP-MS;酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)(ELISA)
蛋白質(zhì)組學(xué)
蛋白芯片檢測;蛋白質(zhì)譜鑒定與序列測定;iTRAQ;雙向凝膠電泳
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