
HuProt™20K人類蛋白組芯片,芯片上有超過(guò)2萬(wàn)種人類全長(zhǎng)蛋白質(zhì),覆蓋81%的人類基因組ORF區(qū),是目前世界上通量最高的蛋白質(zhì)芯片。重組蛋白采用酵母表達(dá)系統(tǒng),逐個(gè)進(jìn)行表達(dá)與純化鑒定。在芯片上每個(gè)蛋白質(zhì)均設(shè)置技術(shù)重復(fù),并設(shè)有多種質(zhì)控點(diǎn),確保實(shí)驗(yàn)體系穩(wěn)定可靠。該芯片已經(jīng)在研究領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用,如蛋白質(zhì)相互作用、自身抗體標(biāo)志物譜、抗體特異性、小分子靶標(biāo)研究、DNA/RNA與蛋白互作研究。
| 芯片蛋白分類
HuProt™20K人類蛋白組芯片通過(guò)化學(xué)修飾共價(jià)結(jié)合超過(guò)16794種人類基因編碼蛋白和124種小鼠基因編碼蛋白質(zhì)。這些蛋白廣泛覆蓋受體、轉(zhuǎn)錄因子、激酶、胞外基質(zhì)蛋白、細(xì)胞骨架蛋白等30余種蛋白類型,可用于多種生物學(xué)功能的創(chuàng)新研究。

| 芯片蛋白規(guī)格
● 芯片標(biāo)準(zhǔn):1×25×76mm硅片片基,蛋白點(diǎn)徑~60μm,體積0.5~1 nL;
● 技術(shù)重復(fù):每個(gè)蛋白點(diǎn)2次技術(shù)重復(fù);
● 熒光檢測(cè):可使用單一或多色標(biāo)簽;
● 純化體系:所有蛋白質(zhì)在非變性條件下,通過(guò)真核酵母表達(dá)體系表達(dá)純化;
● 生產(chǎn)條件:溫度4-8℃,濕度30~40%點(diǎn)樣,4℃過(guò)夜固定,-80℃長(zhǎng)期保存。
| 芯片優(yōu)勢(shì)
● 體外實(shí)驗(yàn),蛋白載量高,鑒定更全面;
● 無(wú)需克隆構(gòu)建、細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn);
● 可確定直接結(jié)合蛋白,無(wú)需質(zhì)譜鑒定;
● 適用于蛋白、小分子、血清等多類型樣本;
● 驗(yàn)證效率高,實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、全面;
● 可定制小芯片,用于擴(kuò)大樣本驗(yàn)證實(shí)驗(yàn);
| HuProt™20K人類蛋白組芯片 檢測(cè)列表
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| 蛋白芯片應(yīng)用
HuProt™20K人類蛋白組芯片適用于以蛋白質(zhì)相互作用為基礎(chǔ)原理的各種研究領(lǐng)域,具備廣泛的應(yīng)用價(jià)值。在蛋白與蛋白相互作用篩選、蛋白與核酸相互作用鑒定方面相比傳統(tǒng)的co-IP聯(lián)合質(zhì)譜鑒定的技術(shù)路線,更加高效和準(zhǔn)確。在小分子藥靶鑒定、單克隆抗體特異性篩選、脂類結(jié)合蛋白篩選、酶作用底物鑒定及自身抗體類biomarker的篩選等應(yīng)用中,其技術(shù)優(yōu)勢(shì)不可替代。

● 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用 —— 腫瘤侵襲、微生物感染、免疫、耐藥、信號(hào)網(wǎng)絡(luò)
● 小分子-蛋白質(zhì)相互作用 —— 藥物靶點(diǎn)篩選、信號(hào)調(diào)節(jié)、細(xì)胞功能調(diào)控
● 核酸-蛋白質(zhì)相互作用 —— 基因修復(fù)、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、RNA毒性、LncRNA調(diào)控機(jī)制
● 脂類-蛋白質(zhì)相互作用 —— 微生物感染、腫瘤侵襲、耐藥、脂代謝調(diào)控
● 自身抗體譜篩選 —— 疾病標(biāo)志物(Biomarker)開發(fā)、疾病機(jī)制研究
● 酶作用底物篩選 —— 翻譯后修飾調(diào)控、信號(hào)網(wǎng)絡(luò)、蛋白功能
● 抗體特異性檢測(cè) —— 抗體特異性評(píng)價(jià)、抗原鑒定、疫苗開發(fā)
(一)疾病標(biāo)志物研究:自身抗體譜篩選
腫瘤、炎癥、自身免疫性疾。ㄈ纾杭t斑狼瘡、類風(fēng)關(guān)、克隆氏病、多發(fā)性硬化)等多種疾病中,體內(nèi)產(chǎn)生和累積大量的自身抗體。HuProt™20K蛋白組芯片覆蓋~2萬(wàn)種人類蛋白質(zhì),能夠結(jié)合并大規(guī)模篩選這些人類自身抗體,從而為多種疾病的診斷、預(yù)后、藥效評(píng)價(jià)等提供豐富候選標(biāo)志物。

HuProt™ 20K用于biomarker篩選的技術(shù)優(yōu)勢(shì)
● 芯片覆蓋近2萬(wàn)種人類蛋白質(zhì),獲得biomarker可能性大;
● 較質(zhì)譜技術(shù)更適用于血清/血漿蛋白篩選;
● 特別適合自身免疫病及自身抗體類疾病標(biāo)志物的篩選;
● 可追溯組織中自身抗體對(duì)應(yīng)抗原的異常,理解發(fā)病機(jī)理;
● 可訂制小芯片,用于擴(kuò)大樣本驗(yàn)證實(shí)驗(yàn);
● 研究成果的轉(zhuǎn)化應(yīng)用和開發(fā)有極強(qiáng)便利性。
蛋白芯片應(yīng)用案例:背靠背:兩篇Cell文章揭示自身免疫疾病診斷研究新進(jìn)展
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(二)蛋白質(zhì)相互作用譜篩選
蛋白質(zhì)在體內(nèi)基本全部以蛋白復(fù)合狀態(tài)發(fā)揮功能,對(duì)蛋白復(fù)合物成員的識(shí)別和研究是認(rèn)識(shí)和理解蛋白功能的關(guān)鍵。高通量HuProt 20K蛋白組芯片是蛋白(抗體)互作譜鑒定的有力工具,通過(guò)釣餌蛋白與芯片上包被的~2萬(wàn)種背景信息清晰的蛋白質(zhì)進(jìn)行互作反應(yīng),能夠極大提高相互作用蛋白的篩選范圍和工作效率。

HuProt™20K蛋白組芯片與免疫共沉淀(Co-IP)比較的優(yōu)勢(shì)
● 無(wú)需進(jìn)行克隆構(gòu)建、細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染等實(shí)驗(yàn);
● 無(wú)需免疫沉淀實(shí)驗(yàn),不受靶蛋白表達(dá)量和共沉淀效率影響;
● 直接判定互作蛋白,無(wú)需進(jìn)行質(zhì)譜(MS)鑒定;
● 更加直觀、可靠和快速,有效提高工作效率;
● 待測(cè)蛋白無(wú)特異性抗體仍然可以進(jìn)行檢測(cè);
● 待測(cè)蛋白有無(wú)純化標(biāo)簽(Tag)都可以檢測(cè);
● 體外實(shí)驗(yàn),覆蓋范圍更廣泛,可鑒定更多互作蛋白類型和靶點(diǎn)。
蛋白芯片應(yīng)用案例:與乙肝病毒X基因(HBx-E2)變異蛋白互作的宿主蛋白的發(fā)現(xiàn)(J Hepatol. 2019 May;70(5):904-917.)
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(三)DNA/RNA結(jié)合蛋白篩選
HuProt™20K 蛋白組芯片可實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)與核酸(DNA/RNA)特異性結(jié)合的高通量篩選。該芯片可迅速定位與目的核酸結(jié)合的蛋白質(zhì)及其背后豐富的生物信息,在轉(zhuǎn)錄因子篩選、LncRNA調(diào)控、 RNA毒性、病原微生物侵襲等研究中發(fā)揮重要作用。

HuProt™ 20K 篩選核酸結(jié)合蛋白的技術(shù)優(yōu)勢(shì)
● 無(wú)需克隆構(gòu)建、細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn);
● 無(wú)需細(xì)胞核蛋白的提取,不受蛋白表達(dá)水平影響;
● 無(wú)需進(jìn)行免疫沉淀實(shí)驗(yàn),不受共沉淀效率影響;
● 與EMSA、ChIP、RIP比較,更適合篩選需求;
● 直接確定結(jié)合蛋白,無(wú)需進(jìn)行質(zhì)譜鑒定;
● 快速可靠,各蛋白信息清晰,驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)便;
● 體外實(shí)驗(yàn),覆蓋范圍更廣泛,可鑒定更多互作蛋白類型和靶點(diǎn)。
蛋白芯片應(yīng)用案例: Clin Transl Med| LncRNA直接結(jié)合蛋白的篩選與深入機(jī)制挖掘的范例
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(四)小分子&單抗藥物靶點(diǎn)篩選
化學(xué)小分子和單克隆抗體是目前主要的靶向藥物來(lái)源,然而經(jīng)典的藥物研發(fā)體系往往需要15-20年的時(shí)間才能開發(fā)出適用于臨床的靶向藥物,且研發(fā)失敗率非常高。
HuProt™20K 蛋白質(zhì)組芯片作為簡(jiǎn)便、快速和準(zhǔn)確的藥物靶點(diǎn)篩選實(shí)驗(yàn)技術(shù),該蛋白芯片可以快速地定性和相對(duì)定量地分析經(jīng)過(guò)熒光、生物素標(biāo)記的小分子或單克隆抗體藥物與~2萬(wàn)種人類全長(zhǎng)蛋白質(zhì)的結(jié)合情況,判斷候選分子的結(jié)合靶點(diǎn)和特異性,為藥物研發(fā)體系的改進(jìn)提供強(qiáng)大的技術(shù)保障。

蛋白芯片應(yīng)用案例: 蛋白芯片技術(shù)應(yīng)用于雷公藤紅素新靶點(diǎn)尋找(Circ. Res., 2020, 126: 1007-1023.)
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