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基因克隆

基因克隆


Gene cloning
基因克隆技術(shù)在體外將DNA分子片段與載體DNA片段連接，轉(zhuǎn)入細(xì)胞獲得大量拷貝的過程中DNA分子克隆(或基因克隆)。
服務(wù)類別：分子與細(xì)胞總訪問：2206
最后更新：2013-8-1半年訪問：38
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其基本步驟包括：制備目的基因→將目的基因與載體

用限制性內(nèi)切酶切割和連接，制成DNA重組→導(dǎo)入宿

主細(xì)胞→篩選、鑒定→擴(kuò)增和表達(dá)。載體（vectors）

在細(xì)胞內(nèi)自我復(fù)制，并帶動(dòng)重組的分子片段共同增

殖，從而產(chǎn)生大量的DNA分子片段。

 

佰而林實(shí)驗(yàn)流程：

1.以動(dòng)物組織或者細(xì)胞為模版，提取獲得DNA或者

cDNA；

2.DNA/cDNA進(jìn)行PCR獲得目的基因；

3.構(gòu)建重組表達(dá)載體；

4.獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種；

5.測(cè)序、PCR、酶切檢測(cè)驗(yàn)證構(gòu)建重組載體成功。

 

客戶需提供克隆基因信息、載體信息以及相關(guān)的參考

文獻(xiàn)。

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