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使用DNA或者RNA 探針來檢測與其互補(bǔ)的另一條鏈在細(xì)菌或其他真核細(xì)胞中的位置。分為菌落原位雜交和組織原位雜交。
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組織或細(xì)胞的原位雜交與菌落的原位雜交不同。菌落原位雜交需裂解細(xì)菌釋出DNA ，然后進(jìn)行雜交。而組織或細(xì)胞的原位雜交是經(jīng)適當(dāng)處理后，使細(xì)胞通透性增加，讓探針進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)與DNA或RNA 雜交。因此原位雜交可以確定探針的互補(bǔ)序列在胞內(nèi)的空間位置。
探針： 用于原位雜交的探針可以是單鏈或雙鏈DNA ，也可以是RNA 探針。通常探針的長度以100～400nt為宜，過長則雜交效率減低。最近研究結(jié)果表明，寡核苷酸探針（16 ～ 30nt）能自由出入細(xì)菌和組織細(xì)胞壁，雜交效率明顯高于長探針。因此，寡核苷酸探針和不對稱PCR標(biāo)記的小 DNA 探針或體外轉(zhuǎn)錄標(biāo)記的 RNA 探針是組織原位雜交的優(yōu)選探針。
標(biāo)記： 探針的標(biāo)記物可以是放射性同位素（如 3H 、35S 、32P ），也可以是非放射性生物素和半抗原等（熒光素，生物素、地高辛等）。
原位雜交有很高的敏感性和特異性，可進(jìn)一步從分子水來探討細(xì)胞的功能表達(dá)及其調(diào)節(jié)機(jī)制。原位雜交能在成分復(fù)雜的組織中進(jìn)行單一細(xì)胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響，因此對于那些細(xì)胞數(shù)量少且散在于其他組織中的細(xì)胞內(nèi)DNA或RNA研究更為方便；同時(shí)由于原位雜交不需要從組織中提取核酸，對于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性，并可完整地保持組織與細(xì)胞的形態(tài)，更能準(zhǔn)確地反映出組織細(xì)胞的相互關(guān)系及功能狀態(tài)。
我們公司的自發(fā)產(chǎn)品有FISH和地高辛標(biāo)
記的原位雜交試劑盒，實(shí)驗(yàn)原價(jià)為200
元/樣，促銷價(jià)僅為150元/樣。機(jī)會(huì)難
得，不容錯(cuò)過。
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