免疫學技術專題：中性粒細胞吞噬功能的測定

中性粒細胞（polymorphonuclear leukocyte，PMN）的功能包括粘附、移動、吞噬殺菌等，是機體天然免疫力的重要組成部分。

試劑及材料

1. 白色葡萄球菌

2. 肉湯培養(yǎng)基

3. 鹼性美藍液

操作方法

1. 菌液的制備  將白色葡萄球菌接種于中，放37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)12h左右；置水浴中加熱100℃ 10min殺死細菌，用無菌生理鹽水稀釋成6×10⁸ 細菌/ml備用；

2. 用血紅蛋白吸管吸取受試者耳垂或指血40μl，立即加入盛有20μl肝素（濃度為20U/ml）的潔凈凹玻片的凹孔內(nèi)，輕輕攪動混勻， 再加上述葡萄球菌菌液20μl充分混勻。然后置入鋪有濕紗布的有蓋容器內(nèi)（此容器先放37℃溫箱中預溫），在37℃溫箱中作用30min，其間每隔10min搖勻一次；

3. 作用完畢，取1小滴混合液置于潔凈無油污的載玻片一端，推成薄片。待干后，用甲醇固定4～5min，鹼性美藍液染2～3min，置油鏡下觀察。隨機計數(shù)100個中性粒細胞，分別記錄發(fā)生吞噬和未吞噬的白細胞數(shù)，對有吞噬作用的白細胞，應同時記錄所吞噬的細菌數(shù)；

結果分析

吞噬細胞%=即100個中性粒細胞中吞噬有細菌的細胞數(shù)；

吞噬指數(shù)=將100個中性粒細胞所吞噬的細菌總數(shù)除以100，得到每個白細胞吞噬細菌的平均數(shù)，即為吞噬指數(shù)。