細(xì)胞培養(yǎng)的小細(xì)節(jié)，大成就

細(xì)胞都沒有絕對(duì)固定的培養(yǎng)條件，只是更加適合。所以在培養(yǎng)的時(shí)候我們需要不斷的優(yōu)化和改進(jìn)培養(yǎng)方式，以便得到更好的細(xì)胞，比如在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中也很容易生長(zhǎng)�？傊�，MEM是貼壁細(xì)胞最好的選擇，而 RPMI-1640是懸浮細(xì)胞培養(yǎng)一個(gè)好的開始，當(dāng)然，這是在對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)條件不明確的時(shí)候的明智之舉，當(dāng)培養(yǎng)條件有標(biāo)注的時(shí)候，需要按照標(biāo)注的來進(jìn)行，因?yàn)楹玫募?xì)胞會(huì)給實(shí)驗(yàn)帶來意想不到的效果

L-谷氨酰胺和GlutaMAX-I

   L-谷氨酰胺(中喬新舟，貨號(hào)：CSP012)在脫掉氨基后可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、多參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時(shí)間后會(huì)降解，而 L-谷氨酰胺的降解會(huì)導(dǎo)致氨的形成，氨對(duì)細(xì)胞有毒性，故敏感細(xì)胞不建議使用。一般培養(yǎng)細(xì)胞建議使用GlutaMAX-I(中喬新舟，貨號(hào)：CSP004)，因?yàn)镚lutaMAX-I 二肽溶液有最小的降解，如果在相同條件下，L-谷氨酰胺幾乎完全降解。

   酚紅：酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用，（特別是雌激素）。為避免固醇類反應(yīng)，培養(yǎng)細(xì)胞，尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí)，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè)，一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí)，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。 

臺(tái)盼蘭怎么計(jì)數(shù)活細(xì)胞？

    用無血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200～2000個(gè)/毫升，在0.1毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1毫升的0.4％的臺(tái)盼蘭溶液。輕輕混勻，數(shù)分鐘后，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞。活細(xì)胞排斥臺(tái)盼蘭，不會(huì)有任何變化，而染成藍(lán)色的細(xì)胞就是死細(xì)胞。