Tris 是一種常用的緩沖鹽,在生物醫(yī)藥領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。它主要用于調(diào)節(jié)溶液的酸堿性,能夠有效工作在 pH 7.0-9.2 的范圍內(nèi)。Tris 常被用于蛋白質(zhì)或核酸的緩沖液中。其化學(xué)式為 C4H11NO3,CAS 號(hào)為 77-86-1,外觀為白色結(jié)晶顆粒。
生物緩沖劑系統(tǒng)包含幾十個(gè)品種。典型品種如Tris、HEPES等。本文將介紹Tris緩沖劑使用注意事項(xiàng)。
注意事項(xiàng):
1.Tris緩沖液的pH值受溫度影響大,△pKa/℃=-0.031 ,例如:4℃時(shí)緩沖液的pH=8.4,則37℃時(shí)的pH=7.4,所以一定要在使用溫度下進(jìn)行配制,室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃~4℃。
2.Tris緩沖液對(duì)某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,需使用與Tris溶液具有兼容性的電極;
3.Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大,緩沖液稀釋十倍,pH值的變化大于0.1
4. 吸入,攝入,皮膚吸收Tris可造成傷害,操作時(shí)需戴好手套和護(hù)目鏡;
5. Tris緩沖液易吸收空氣中的CO2,配制的緩沖液要注意蓋嚴(yán)密封;
6. Tris在一定程度上與各種分子反應(yīng),包括RNA酶抑制劑,醛,酶,DNA以及常見金屬如Cr3+,F(xiàn)e3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系統(tǒng)中會(huì)起抑制作用,在配制過程中需考慮與其他組分之間的相互作用;
7. Tris緩沖液不適用于BCA測(cè)定;
8. 作為蛋白緩沖液時(shí),若后續(xù)工作需要質(zhì)譜,則不適宜用Tris,較好換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。
生物緩沖劑在生物化學(xué)研究中扮演著重要角色,廣泛應(yīng)用于免疫印跡、生物芯片、生物雜交等實(shí)驗(yàn)以及體外診斷和生物醫(yī)藥行業(yè)等領(lǐng)域。其應(yīng)用之廣泛可見其在科學(xué)研究和實(shí)際應(yīng)用中的重要意義。