自動(dòng)高通量法測(cè)定杉木對(duì)多回線蟲(chóng)的殺蟲(chóng)活性

Antihelminthic Activity of Lophira Lanceolata on Heligmosomoides polygyrus Using an Automated High-Throughput Method” 發(fā)表于Journal of Tropical Medicine，研究發(fā)現(xiàn)披針葉羅庚梅提取物對(duì)多形螺旋線蟲(chóng)有抗蠕蟲(chóng)活性，但需進(jìn)一步研究其安全性和毒性。

1.研究背景：蠕蟲(chóng)病在非洲發(fā)展中國(guó)家流行，因缺乏關(guān)注和資金被列為被忽視的熱帶病�，F(xiàn)有合成驅(qū)蟲(chóng)藥出現(xiàn)耐藥性、有副作用且不易獲取，喀麥隆當(dāng)?shù)爻Ｓ貌菟幹委熑湎x(chóng)病。披針葉羅庚梅在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中應(yīng)用廣泛，本研究用自動(dòng)化高通量方法評(píng)估其抗蠕蟲(chóng)活性。

2.材料和方法

實(shí)驗(yàn)材料：多形螺旋線蟲(chóng)感染性三期幼蟲(chóng)由英國(guó)愛(ài)丁堡大學(xué)提供；披針葉羅庚梅葉子采自喀麥隆西部，經(jīng)國(guó)家植物標(biāo)本館鑒定并編號(hào)；制備水提物和醇提物；通過(guò)浮選技術(shù)收集和濃縮蟲(chóng)卵，培養(yǎng)蟲(chóng)卵獲取 L1 和 L2 幼蟲(chóng)。

實(shí)驗(yàn)方法：采用自動(dòng)化高通量設(shè)備 WMicrotracker，進(jìn)行蟲(chóng)卵孵化試驗(yàn)和幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)性測(cè)定評(píng)估提取物抗蠕蟲(chóng)活性，同時(shí)對(duì)提取物進(jìn)行植物化學(xué)成分篩選。研究遵循倫理準(zhǔn)則，數(shù)據(jù)用 GraphPad Prism 8.0 分析，計(jì)算半數(shù)抑制濃度（）評(píng)估抗蠕蟲(chóng)效果。

3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果

水提物和醇提物對(duì)蟲(chóng)卵孵化率的影響：橫坐標(biāo)為提取物濃度及對(duì)照，縱坐標(biāo)為蟲(chóng)卵孵化率。5mg/mL 時(shí)，水提物和醇提物孵化率分別為 5.0±5.0% 和 11.66±2.8% ，蒸餾水和 1.5% DMSO 孵化率 100%。0.3125mg/mL 和 0.625mg/mL 時(shí)，醇提物孵化率較高，分別為 65±8.6% 和 76.66±15.2%，直觀展示提取物抑制蟲(chóng)卵孵化效果。

蟲(chóng)卵孵化的半數(shù)抑制濃度（）：橫坐標(biāo)為濃度對(duì)數(shù)（mg/mL），縱坐標(biāo)為抑制率。醇提物IC50為1.4mg/mL ，水提物未確定，表明醇提物對(duì)蟲(chóng)卵孵化抑制作用更強(qiáng)。

水提物和醇提物對(duì)多形螺旋線蟲(chóng) L1 幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)抑制率：橫坐標(biāo)為提取物濃度及對(duì)照，縱坐標(biāo)為幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)抑制率。5mg/mL 時(shí)，水提物和醇提物抑制率分別為 86.66±5.77 和 96.66±6.44 ，均接近陽(yáng)性對(duì)照左旋咪唑（96.67±2.88），蒸餾水和 1.5% DMSO 抑制率 0%，顯示提取物對(duì) L1 幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)抑制效果及濃度依賴關(guān)系。

L1 幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)的半數(shù)抑制濃度（）：橫坐標(biāo)為濃度對(duì)數(shù)（mg/mL），縱坐標(biāo)為抑制率。水提物和醇提物IC50分別為 1.85mg/mL 和 2.4mg/mL，表明醇提物對(duì) L1 幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)抑制活性更強(qiáng)。

水提物和醇提物對(duì)多形螺旋線蟲(chóng) L2 幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)抑制率：橫坐標(biāo)為提取物濃度及對(duì)照，縱坐標(biāo)為幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)抑制率。5mg/mL 時(shí)，水提物和醇提物抑制率分別為 93.33±5.77 和 100±0.0 ，差異顯著，蒸餾水和 1.5% DMSO 無(wú)抑制作用，左旋咪唑抑制率 100%，體現(xiàn)提取物對(duì) L2 幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)抑制效果及濃度依賴關(guān)系。

L2 幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)的半數(shù)抑制濃度（）：橫坐標(biāo)為濃度對(duì)數(shù)（mg/mL），縱坐標(biāo)為抑制率。水提物和醇提物分別為 1.08mg/mL 和 1.02mg/mL，表明醇提物對(duì) L2 幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)抑制活性更強(qiáng)。

結(jié)果表明：

蟲(chóng)卵孵化試驗(yàn)：5mg/mL 時(shí)，水提物和醇提物顯著抑制蟲(chóng)卵孵化；醇提物的為 1.4mg/mL ，水提物未確定，表明醇提物對(duì)蟲(chóng)卵孵化抑制作用更強(qiáng)。

幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)性測(cè)定：5mg/mL 時(shí)，水提物和醇提物對(duì) L1、L2 幼蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)性抑制明顯，呈濃度依賴性；L1 幼蟲(chóng)中，醇提物和水提物分別為 1.85mg/mL 和 2.4mg/mL；L2 幼蟲(chóng)中，二者分別為 1.02mg/mL 和 1.08mg/mL，顯示醇提物活性更高。植物化學(xué)成分篩選顯示水提物化學(xué)成分種類更多。

4.研究討論：醇提物對(duì)蟲(chóng)卵孵化抑制作用可能與提取物中的皂苷有關(guān)，其抑制蟲(chóng)卵孵化結(jié)構(gòu)發(fā)育或影響蟲(chóng)卵滲透壓。提取物對(duì) L1、L2 幼蟲(chóng)有殺幼蟲(chóng)活性，醇提物效果更佳，L1 幼蟲(chóng)更敏感。提取物的抗蠕蟲(chóng)特性可能源于其所含的多種次生代謝物。

5.研究結(jié)論：本研究科學(xué)驗(yàn)證了披針葉羅庚梅在喀麥隆民間醫(yī)學(xué)中對(duì)抗蠕蟲(chóng)的作用，但需進(jìn)一步開(kāi)展體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和毒性測(cè)試，以評(píng)估其安全性，確定能否作為抗寄生蟲(chóng)藥物。

WMicrotracker小動(dòng)物活動(dòng)力分析系統(tǒng)，為測(cè)試培養(yǎng)于液體中的小模式動(dòng)物而優(yōu)化設(shè)計(jì)，在24、48、96或384孔板中自動(dòng)量化小模式動(dòng)物的行為活動(dòng)。已成功證明了可應(yīng)用于例如線蟲(chóng)（C.elegans）、斑馬魚(yú)幼蟲(chóng)（Zebrafish larvae）和其它昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)（insects larvae），應(yīng)用于化合物篩選、RNAi/嗎-啉試驗(yàn)、轉(zhuǎn)基因試驗(yàn)、長(zhǎng)周期測(cè)試或自定義實(shí)驗(yàn)；毒性測(cè)試、麻痹試驗(yàn)、代謝試驗(yàn)、疾病模型、突觸調(diào)節(jié)器、抗逆性、健康期（衰老）、趨化性、卵孵化等實(shí)驗(yàn)。
 

歡迎關(guān)注進(jìn)科馳安官方微信（微信公眾號(hào)：Bio-Gene）
回復(fù)：行為測(cè)定，查看更多相關(guān)視頻
長(zhǎng)按/掃描以下二維碼可識(shí)別關(guān)注公眾號(hào)

廣州進(jìn)科馳安科技有限公司
Bio-Gene Technology Ltd.
熱線：176 2009 3784
www.bio-gene.com.cn
marketing@bio-gene.com.cn
香港 北京 上海 廣州 成都 濟(jì)南