細(xì)胞外囊泡在液體活檢中臨床應(yīng)用共識(shí)解讀,EVs從實(shí)驗(yàn)室到病床邊的跨越

細(xì)胞外囊泡（EVs）是細(xì)胞分泌的納米級(jí)膜囊泡，攜帶 DNA、RNA、蛋白質(zhì)等生物信息，廣泛存在于血液、唾液、尿液、淚液等體液中。EVs 憑借獨(dú)特的生物學(xué)特性，在細(xì)胞間通訊中扮演關(guān)鍵角色，參與免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞增殖、分化等重要生理過(guò)程，同時(shí)與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，在疾病的早期診斷、治療監(jiān)測(cè)、靶向治療以及預(yù)后評(píng)估等方面展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用潛力，因此成為生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。

盡管 EVs 相關(guān)的科學(xué)研究取得了顯著進(jìn)展，但目前行業(yè)的發(fā)展仍面臨諸多挑戰(zhàn)。在基礎(chǔ)研究方面，雖然已經(jīng)認(rèn)識(shí)到 EVs 具有重要的生物學(xué)功能，但尚未明確其具體的形成機(jī)制、分類標(biāo)準(zhǔn)以及不同亞型 EVs 的功能差異等。在技術(shù)層面，缺乏統(tǒng)一、標(biāo)準(zhǔn)化的樣本采集、分離、鑒定和分析方法，這使得不同研究之間的結(jié)果難以比較和整合，限制了 EVs 研究成果的臨床轉(zhuǎn)化。此外，EVs 作為疾病生物標(biāo)志物的篩選和驗(yàn)證過(guò)程復(fù)雜，面臨著靈敏度和特異性不足等問(wèn)題。

為了應(yīng)對(duì)這些挑戰(zhàn)，推動(dòng) EVs 研究從基礎(chǔ)走向臨床應(yīng)用，中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)腫瘤標(biāo)志物專業(yè)委員會(huì)外泌體與微囊泡學(xué)組（CSEMV）的專家們?cè)?2018 年發(fā)布的《外泌體轉(zhuǎn)化研究與臨床實(shí)踐的中國(guó)專家共識(shí)》基礎(chǔ)上，結(jié)合近年來(lái) EVs 領(lǐng)域的最新研究成果和發(fā)展趨勢(shì)，重新梳理和總結(jié)相關(guān)知識(shí)，于近期發(fā)布了《細(xì)胞外囊泡在液體活檢中的臨床應(yīng)用共識(shí)》。這是全球首個(gè)系統(tǒng)性規(guī)范 EVs 從分離、表征到臨床應(yīng)用全流程的指南，推動(dòng)其從實(shí)驗(yàn)室向臨床的跨越，賦能精準(zhǔn)醫(yī)療，助力構(gòu)建“早篩-診斷-治療”閉環(huán)！

納米流式檢測(cè)技術(shù)（nFCM）被共識(shí)列為EV單顆粒分析的金標(biāo)準(zhǔn)（圖1），其技術(shù)意義遠(yuǎn)超傳統(tǒng)方法：
 

圖1. EV單顆粒分析技術(shù)

01 高靈敏度檢測(cè)
突破光學(xué)檢測(cè)極限，可通過(guò)散射直接檢測(cè)到直徑低至 40 nm 的 EVs，大大提高了對(duì)微小囊泡的檢測(cè)能力，這對(duì)于研究低豐度 EVs 或檢測(cè)疾病早期的微弱變化具有重要意義，有助于發(fā)現(xiàn)更多潛在的生物標(biāo)志物，提高疾病診斷的準(zhǔn)確性和早期檢出率。

02 多參數(shù)表征
可以同時(shí)對(duì) EVs 的粒徑、濃度、表面及腔內(nèi)蛋白甚至核酸進(jìn)行快速分析，單次檢測(cè)即可獲取更全面的信息。通過(guò)精確測(cè)量粒徑分布和濃度，能夠更準(zhǔn)確地評(píng)估 EVs 的質(zhì)量和數(shù)量變化；對(duì)蛋白和核酸的分析則有助于區(qū)分不同亞型的 EVs，深入了解其功能和來(lái)源，為研究 EVs 在細(xì)胞間通訊和疾病發(fā)生發(fā)展中的作用提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)支持。

03 臨床落地
nFCM 已應(yīng)用于結(jié)直腸癌、前列腺癌、肺癌、卵巢癌、鼻咽癌等 EV 標(biāo)志物研究，共識(shí)的背書將推動(dòng)其臨床落地。

•  早期診斷：鼻咽癌血漿 EVs 的 5 種蛋白標(biāo)志物診斷準(zhǔn)確性提升至 96.3%；（參見往期文章：廈大團(tuán)隊(duì)揭秘如何通過(guò) EVs 區(qū)分癌癥和炎癥）

圖2. 鼻咽癌早期診斷

• 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)：新冠感染者血漿 EVs Spike 和 CD31 蛋白的動(dòng)態(tài)變化預(yù)測(cè)免疫治療響應(yīng)；（參見往期文章：熱點(diǎn) | 血清外泌體及時(shí)響應(yīng) COVID-19 感染）

圖3. 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)新冠感染者外泌體 Spike 和 CD31 蛋白圖3. 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)新冠感染者外泌體 Spike 和 CD31 蛋白

• 預(yù)后評(píng)估：結(jié)直腸癌患者術(shù)后血漿 EVs CD147 水平下降。

圖4. 結(jié)直腸癌術(shù)后監(jiān)測(cè)

未來(lái)展望
隨著該共識(shí)和納米流式檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用，我們有理由相信液體活檢將邁入“單囊泡級(jí)精準(zhǔn)診療”時(shí)代！基于共識(shí)制定的標(biāo)準(zhǔn)化工作流程和 nFCM 的單囊泡檢測(cè)能力，能精準(zhǔn)識(shí)別更多疾病相關(guān)的 EVs 生物標(biāo)志物，實(shí)現(xiàn)癌癥、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等多種疾病的早期診斷和病情的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，提升疾病診斷的準(zhǔn)確率。同時(shí)，在治療方面，EVs 作為藥物載體的潛力將被充分挖掘，結(jié)合 nFCM 對(duì)藥物載體質(zhì)量的把控，推動(dòng)個(gè)性化治療方案的發(fā)展，在提高治療效果的同時(shí)降低副作用。此外，將促進(jìn)科研機(jī)構(gòu)、高校和企業(yè)間的深度合作，形成完整的 EVs 研究產(chǎn)業(yè)鏈，加速相關(guān)科研成果轉(zhuǎn)化為實(shí)際臨床應(yīng)用。未來(lái)，EVs 研究與應(yīng)用將更加規(guī)范、高效，為人類健康事業(yè)提供更多創(chuàng)新解決方案，帶來(lái)更多福祉。

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