Andrade氏糖類肉湯說(shuō)明書

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Andrade氏糖類肉湯說(shuō)明書

英文名稱：Andrade's Carbohydrade Broth
產(chǎn)品規(guī)格：250g
產(chǎn)品用途：用于細(xì)菌的糖發(fā)酵試驗(yàn)
產(chǎn)品介紹:
用途:用于細(xì)菌的糖發(fā)酵試驗(yàn)。
成分(g/L)
蛋白胨 10.0
牛肉浸粉 3.0
氯化鈉 10.0
酸性品紅 0.1
pH值7.6 ± 0.2 25℃
用法
稱取本品 23.1g ,另稱取糖類或醇類(葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇按 10g 稱取;其他糖類或醇類按 5g 稱取),加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝試管,121℃高壓滅菌 15 分鐘,備用。

Andrade氏糖類肉湯說(shuō)明書【實(shí)驗(yàn)方法】
1.產(chǎn)品名稱培養(yǎng)基陽(yáng)性組：取稀釋后的各試驗(yàn)菌懸液1ml分別加于預(yù)先制備的試管培養(yǎng)基中，每種細(xì)菌接種兩支試管。同時(shí)分別取1ml菌懸液加于無(wú)菌空平皿中，用于計(jì)數(shù)，每種細(xì)菌做兩個(gè)平板。
2. 培養(yǎng)基陰性組：即空白對(duì)照，即不添加菌液。
3. 接種量計(jì)數(shù)：步驟1中的平皿中，細(xì)菌傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，霉菌和白色念珠菌傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。同時(shí)每種培養(yǎng)基做1個(gè)空白。
4. 培養(yǎng)條件：
   無(wú)菌檢查：20～25℃培養(yǎng)14天或直至出現(xiàn)渾濁（不超過(guò)14天）
   MPN計(jì)數(shù)：30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天
   控制菌檢查：30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24小時(shí)
   傾注計(jì)數(shù)用的的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板置30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天
   傾注計(jì)數(shù)用的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板置20～25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3～5天
Andrade氏糖類肉湯說(shuō)明書【操作步驟】
（一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。
（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。
（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到徹底滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝�的穿透力�?qiáng)，殺菌效果好。

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