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貨號 | 17539 | 存儲條件 | f/l |
規(guī)格 | 25 mg | ||
Ex (nm) | 368 | Em (nm) | 501 |
分子量 | 596.96 | 溶劑 | DMSO |
產(chǎn)品詳細介紹 |
產(chǎn)品基本信息
貨號:17539
產(chǎn)品名稱:核黃 [Hoechst S769121]神經(jīng)元示蹤染料
規(guī)格:25mg
儲存條件:-20℃干燥
保質(zhì)期:24個月
產(chǎn)品物理化學光譜特性
分子量:651.01
外觀:亮黃色粉末
溶劑:水或DMSO
激發(fā)波長(nm):355
發(fā)射波長(nm):495
產(chǎn)品介紹
Hoechst染料是一系列熒光染料,用于標記熒光顯微鏡和流式細胞儀中使用的DNA。因為這些熒光染色標記DNA,它們也常用于可視化細胞核和線粒體。通常使用這些密切相關(guān)的雙苯并酰亞胺中的兩種,Hoechst 33258和Hoechst 33342。兩種染料都被約350nm的紫外光激發(fā),并且都發(fā)射藍/青色熒光,發(fā)射最大值為461nm。 Hoechst染色劑可以與活細胞或固定細胞一起使用,并且通常用作另一種核酸染色劑DAPI的替代物。它們之間的關(guān)鍵區(qū)別在于Hoechst 33342的額外乙基使其更具親脂性,因此更容易穿過完整的細胞膜。在某些應(yīng)用中,Hoechst 33258的滲透性明顯低于Hoechst 33342.這些染料也可用于通過繪制標準的發(fā)射 - 含量曲線來檢測樣品DNA的含量。
長波示蹤劑核黃通常與流行的逆行示蹤劑True Blue結(jié)合用于雙色神經(jīng)元映射。在神經(jīng)元細胞中,核黃色主要用黃色熒光染色細胞核,而真正的藍色是紫外光可激發(fā)的二價陽離子染料,用藍色熒光染色細胞質(zhì)。當進行免疫組織化學處理時,核黃色和真藍色都是穩(wěn)定的,并且可以用于將DAB光轉(zhuǎn)化成不溶的電子致密反應(yīng)產(chǎn)物。 Hoechst 33258,Hoechst 33342和Nuclear Yellow,當通過軸突逆行運輸?shù)剿鼈兊挠H本細胞體時,可以遷移出軸突和細胞體,如相鄰神經(jīng)膠質(zhì)細胞核的熒光所示。發(fā)現(xiàn)這種遷移在切片在水中儲存期間在體內(nèi)和體外都發(fā)生。當使用1%濃度的示蹤劑時,可以通過限制存活時間來控制體內(nèi)遷移。可以通過材料的快速組織學處理來防止體外遷移。
染色細胞分析方案
以下程序適用于大多數(shù)細胞類型。 生長培養(yǎng)基,細胞密度,其他細胞類型的存在和其他因素可能影響染色。 玻璃器皿上的殘留洗滌劑也可能影響許多生物的染色,導(dǎo)致在有或沒有細胞存在的溶液中出現(xiàn)明亮染色的物質(zhì)。
1)通過離心沉淀細胞
2)將細胞重懸于緩沖溶液或培養(yǎng)基中,在pH7.4下具有最佳染料結(jié)合。
3)在蓋玻片或細胞培養(yǎng)孔中原位染色貼壁細胞。
4)使用0.5和5uM之間的濃度添加Hoechst染色劑。
5)孵育細胞15至60分鐘。
注意:孵育時間和染料濃度需要通過實驗測試。在最初的實驗中,最好在整個建議范圍內(nèi)嘗試幾種染料濃度,以確定產(chǎn)生最佳染色的濃度