HE與特殊染色,細胞凋亡Tune檢測,激光共聚焦檢測,免疫細胞化學(xué)ICC,免疫熒
光IF,免疫組化IHC。
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病理學(xué)服務(wù):激光共聚焦實驗技術(shù)服務(wù)
病理學(xué)實驗研究
HE與特殊染色,細胞凋亡Tune檢測,激光共聚焦檢測,免疫細胞化學(xué)ICC,免疫熒
光IF,免疫組化IHC。
服務(wù)類別:分子與細胞總訪問:1679
最后更新:2014-8-21半年訪問:5
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激光共聚焦實驗技術(shù)服務(wù)

實驗技術(shù)簡介:激光掃描共聚焦顯微鏡是采用激光作為光源,在傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)上采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計算機對所觀察的對象進行數(shù)字圖象處理的一套觀察、分析和輸出系統(tǒng)。主要系統(tǒng)包括激光光源、自動顯微鏡、掃描模塊(包括共聚焦光路通道和針孔、掃描鏡、檢測器)、數(shù)字信號處理器、計算機以及圖象輸出設(shè)備(顯示器、彩色打印機)等。通過激光掃描共聚焦顯微鏡,可以對觀察樣品進行斷層掃描和成像。因此,可以無損傷的觀察和分析細胞的三維空間結(jié)構(gòu)。同時,通過激光掃描共聚焦顯微鏡也是活細胞的動態(tài)觀察、多重免疫熒光標(biāo)記和離子熒光標(biāo)記觀察的有力工具。


主要技術(shù)指標(biāo):
1、共聚焦掃描系統(tǒng)
(1)獨立雙向掃描鏡?梢栽谡蔑@微鏡和倒置顯微鏡之間迅速互換。儀器永久不用校正;可調(diào)的計算機控制單共焦針孔、孔徑20~600μm
(2)光譜掃描區(qū)400~850nm
(3)單線掃描頻率≥2000線/秒
(4)圖掃描率≥3幅/秒512×512pixels;≥20幅/秒512×32pixels
(5)掃描分辨率4096*4096掃描放大1~32X;多方位序列掃描方式;任意形狀區(qū)域掃描-范圍:≥22mm。
(6)光譜斜陡率  ≤1%
(7)透射光檢測器用于微分干涉相襯法檢驗
(8)低噪音 冷卻型光電倍增管(PNT)控測器12bi
2、激光裝置:具有多通道AOTF(四通道,八譜線),連接四種不同波長的可見光激光可以自動選擇激光譜線和功率,具等待功能。光纖耦合連接低能量激光。目前使用五激光,八譜線。Ar激光發(fā)生器 (458nm/5mw,476nm/5mw,488nm/20mw,514nm/20mw)-藍;He/Ne激光發(fā)生器(543nm/1.2mw)-綠;He/Ne激光發(fā)生器(633nm/10mw,594nm/2mv)-紅,紫外激光發(fā)生器(405nm/25mv)
3、顯微鏡:DMIRE2倒置電動熒光顯微鏡,擁有10x,20x,40x干鏡以及63x,100x油鏡。配置電動編碼物鏡轉(zhuǎn)座,Z軸電動驅(qū)動和干涉相襯的編碼棱鏡轉(zhuǎn)輪。
4、計算機工作站:WindowsXP操作系統(tǒng),8個同步接收器通道,12bit同步數(shù)字轉(zhuǎn)換,超寬的SCSI電腦介面,高性能的電腦工作站,兩個監(jiān)視器,計算機彩色顯示


主要附件和功能:觀察細胞精細結(jié)構(gòu)。用于檢測各種染色,非染色和熒光標(biāo)記的組織和細胞等,在可見光范圍內(nèi)熒光的定位定量分析,組織光學(xué)切片,基因染色體定位,基因亞細胞定位,離子通道研究.

檢測的優(yōu)勢:與傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡相比,主要解決了生物樣品結(jié)構(gòu)相互重疊影響觀察的問題,并可形成清晰的三維圖象。在檢測方面的主要優(yōu)勢有:
1、對活細胞和組織或細胞切片進行連續(xù)掃描,可獲得精細的單個或一群細胞或者觀察到局部組織的各個層面結(jié)構(gòu)(包括細胞特異結(jié)構(gòu)—細胞骨架、染色體、細胞器和細胞膜系統(tǒng),樣品的深層結(jié)構(gòu))的三維圖像。
2、細胞內(nèi)離子熒光標(biāo)記,單標(biāo)記或三奈記,檢測細胞內(nèi)如PH和鈉、鈣、鎂等離子濃度的比率測定及動態(tài)變化。
3、熒光標(biāo)記探頭標(biāo)記的活細胞或切片標(biāo)本的活細胞生物物質(zhì),膜標(biāo)記、免疫物質(zhì)、免疫反應(yīng)、受體或配體,核酸等觀察;可以在同一張樣品上進行同時多重物質(zhì)標(biāo)記,同時觀察;
4、熒光檢測快、激發(fā)光強度精確控制、光漂白和熒光淬滅作用小;
5、對細胞檢測無損傷、精確、準確、可靠和優(yōu)良重復(fù)性;數(shù)據(jù)圖象可及時輸出或長期儲存。

樣品要求:
樣品制備無特殊要求;各種染色、非染色、熒光標(biāo)記的組織(包括活組織)、培養(yǎng)細胞、粘附細胞、細胞涂片、石蠟切片、冰凍切片。


應(yīng)用領(lǐng)域:
1、細胞生物學(xué):細胞結(jié)構(gòu)、細胞骨架、細胞膜結(jié)構(gòu)、流動性、受體、細胞器結(jié)構(gòu)和分布變化、細胞凋亡;
2、生物化學(xué):酶、核酸、FISH(熒光原位雜交)、受體分析
3、藥理學(xué):藥物對細胞的作用及其動力學(xué);
4、生理學(xué):膜受體、離子通道、細胞內(nèi)離子含量、分布、動態(tài);
5、遺傳學(xué)和組胚學(xué):細胞生長、分化、成熟變化、細胞的三維結(jié)構(gòu)、染色體分析、基因表達、基因診斷;
6、神經(jīng)生物學(xué):神經(jīng)細胞結(jié)構(gòu)、神經(jīng)遞質(zhì)的成分、運輸和傳遞、遞質(zhì)受體、離子內(nèi)外流、 神經(jīng)組織(如大腦皮質(zhì))結(jié)構(gòu)、細胞分布;
7、微生物學(xué)和寄生蟲學(xué):細菌、寄生蟲形態(tài)結(jié)構(gòu)(表面和內(nèi)部結(jié)構(gòu));
8、病理學(xué)及病理學(xué)臨床應(yīng)用:活檢標(biāo)本的快速診斷、腫瘤診斷、自身免疫性疾病的診斷,HIV,宮頸上皮細胞涂片診斷;
9、生物學(xué)、免疫學(xué)、環(huán)境醫(yī)學(xué)和營養(yǎng)學(xué);


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