實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)

主要實(shí)驗(yàn)步驟如下： 1. 設(shè)計(jì)并合成Realtime PCR引物。 2. 引物溶解后使用TaqDNA聚合酶進(jìn)行含SG（SYBR® Green）的PCR反應(yīng)的優(yōu)化。 3. 客戶樣品RNA抽提 4. RNA質(zhì)量檢測 5. 按照逆轉(zhuǎn)錄酶使用說明將樣品RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。 6. 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品：進(jìn)行相對定量，需要先將樣品的目的基因以及管家基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增，其產(chǎn)物進(jìn)行梯度稀釋用于做標(biāo)準(zhǔn)曲線。 7. 標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品和待測樣品分別加入到含SG的RealTime PCR反應(yīng)液中，進(jìn)行RealTime PCR擴(kuò)增和檢測。 8. 檢測結(jié)果進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線分析，以對待測樣品的目的基因進(jìn)行定量。相對定量實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)一步用樣品的目的基因測得值除以管家基因測得值以校正誤差，所得結(jié)果代表某樣品的目的基因相對含量。 9. 提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法及實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果及相關(guān)圖表。