 |
Lentiviral vector
|
|||||||||||||||||
| [發(fā)表評論] [本類其他服務(wù)] [本類其他服務(wù)商] | ||||||||||||||||||
| 服務(wù)商： 南京科佰生物科技有限公司 | 查看該公司所有服務(wù) >> |
慢病毒包裝：
慢病毒載體（Lentiviral vector, LVs）是在HIV-1病毒基礎(chǔ)上改造而成的病毒載體系統(tǒng)，它能高效的將目的基因（或RNAi）導(dǎo)入動物和人的原代細(xì)胞或細(xì)胞系。慢病毒載體基因組是正鏈RNA，其基因組進(jìn)入細(xì)胞后，在細(xì)胞漿中被其自身攜帶的反轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)為DNA，形成DNA整合前復(fù)合體，進(jìn)入細(xì)胞核后，DNA整合到細(xì)胞基因組中。整合后的DNA轉(zhuǎn)錄mRNA，回到細(xì)胞漿中，表達(dá)目的蛋白；或產(chǎn)生RNAi干擾。
慢病毒載體介導(dǎo)的基因表達(dá)或RNAi干擾作用持續(xù)且穩(wěn)定，原因是目的基因整合到宿主細(xì)胞基因組中，并隨細(xì)胞基因組的分裂而分裂。另外，慢病毒載體能有效感染并整合到非分裂細(xì)胞中。以上特性使慢病毒載體與其它病毒載體相比，比如不整合的腺病毒載體、整合率低的腺相關(guān)病毒載體、只整合分裂細(xì)胞的傳統(tǒng)逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，有鮮明的特色。大量文獻(xiàn)研究表明，慢病毒載體介導(dǎo)的目的基因長期表達(dá)的組織或細(xì)胞包括腦、肝臟、肌肉、視網(wǎng)膜、造血干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等。
慢病毒載體不表達(dá)任何HIV-1蛋白，免疫原性低，在注射部位無細(xì)胞免疫反應(yīng)，體液免疫反應(yīng)也較低，不影響病毒載體的第2次注射。
慢病毒包裝的優(yōu)點：
1、能將外源基因有效整合入宿主染色體，外源基因表達(dá)水平較高、表達(dá)穩(wěn)定；
2、廣泛的宿主，可感染分裂和不分裂的細(xì)胞，幾乎可以感染所有類型的細(xì)胞，特別適合質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染效率低的細(xì)胞；
3、適用范圍廣，可用于體外細(xì)胞系和活體動物模型，研究基因和RNAi等；
4、轉(zhuǎn)導(dǎo)效率高，不需要轉(zhuǎn)染試劑，目的基因整合到宿主細(xì)胞基因組的概率大大增加。
科佰生物擁有豐富的病毒包裝經(jīng)驗，成功為很多客戶包裝出需要的病毒，并且完成相應(yīng)的功能檢測。
技術(shù)路線：
1.獲得目的基因序列；
2.構(gòu)建慢病毒載體；
3.重組質(zhì)粒和包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)，包裝病毒；
4.病毒純化、濃縮；
5.滴度測定。
6.對照組和實驗組感染細(xì)胞，利用抗生素篩選，得到穩(wěn)定單克隆細(xì)胞株（可選）。
服務(wù)說明:
1.客戶提供目的基因的序列，如果提供模板，請告知載體、酶切穩(wěn)點等信息；
2.若實驗材料為原代細(xì)胞或者特殊培養(yǎng)的細(xì)胞，請先咨詢；
3.公司默認(rèn)提供病毒滴度為1x10^8-1x10^9TU/ml,規(guī)格1ml；
4.目的蛋白的功能驗證另外收費(fèi)。
提交的產(chǎn)品和資料:
1.實驗報告；
2.構(gòu)建好的病毒重組質(zhì)粒；
3.提供至少1ml滴度＞1x10^8-1x10^9TU/ml的病毒.
1、詢價及訂購請?zhí)顚?quot;詢價單"，并發(fā)送郵件至sales@cobioer.com
2、根據(jù)客戶信息，我們會上門取樣品
3、如需幫助，請發(fā)送郵件至tech@cobioer.com或撥打025-86880024，科佰生物的技術(shù)支持將竭誠為您服務(wù)。
